穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)選擇需要考慮到哪些因素?
更新時間:2023-06-13 點擊次數(shù):280次
穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)是一種在質(zhì)譜分析中廣泛使用的技術(shù),用于提高測量的準(zhǔn)確性和精確度。它基于同位素比值(即同位素組成),利用添加已知含量的同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來進(jìn)行精確測量和校正。
穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)常用于生物、環(huán)境、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的分析研究中。以生物學(xué)為例,其應(yīng)用可以用于定量分析代謝產(chǎn)物、營養(yǎng)物質(zhì)和藥物等方面。
同位素內(nèi)標(biāo)通常選擇不會干擾樣品分析的同位素,并且與待測分子具有相似的化學(xué)性質(zhì)和行為。常用的內(nèi)標(biāo)包括^2H、^13C、^15N和^18O等,其中最常見的是^13C和^2H。
內(nèi)標(biāo)的選擇需要考慮到以下因素:
1.化學(xué)性質(zhì):內(nèi)標(biāo)應(yīng)該具有與待測分子相似的化學(xué)性質(zhì)和行為,使其在質(zhì)譜分析中表現(xiàn)出相似的峰形態(tài)和裂解模式。
2.同位素豐度:內(nèi)標(biāo)同位素的豐度應(yīng)足夠高,以便在質(zhì)譜中檢測到足夠的信號并進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析。
3.質(zhì)量:內(nèi)標(biāo)應(yīng)該是高純度的,在質(zhì)譜分析中不會引入其他干擾物,影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和精確度。
4.可獲得性:內(nèi)標(biāo)應(yīng)該易于獲得和制備,并且價格合理。
穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的制備通常涉及到以下步驟:
1.選擇適當(dāng)?shù)耐凰貥?biāo)準(zhǔn)物質(zhì),根據(jù)待測化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì),選擇合適的同位素進(jìn)行標(biāo)記。
2.制備含已知內(nèi)標(biāo)量的標(biāo)準(zhǔn)樣品,通過加入已知量的同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來實現(xiàn)。
3.進(jìn)行質(zhì)譜分析,將內(nèi)標(biāo)信號與待測化合物信號進(jìn)行比較,并計算出其相對含量。
在質(zhì)譜分析中,內(nèi)標(biāo)可以被用作外部校準(zhǔn)或內(nèi)部校準(zhǔn)。外部校準(zhǔn)是指使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并將待測樣品的信號與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較。內(nèi)部校準(zhǔn)則是將內(nèi)標(biāo)添加到每個待測樣品中,以檢查質(zhì)譜儀的系統(tǒng)漂移和變化,從而提高測量的準(zhǔn)確性和精確度。