臨床質譜代謝內標使用過程的具體步驟分析
更新時間:2024-06-20 點擊次數(shù):132次
臨床質譜代謝內標是指在樣品制備、分析過程中加入的已知量的穩(wěn)定同位素標記的或結構類似的化合物。它們在樣品處理和分析過程中的行為與被測物質相似,因此可以用于校正樣品處理過程中的誤差,如體積偏差、溶劑蒸發(fā)、萃取效率變化等。在質譜分析中,內標主要用于校正儀器信號的漂移和基質效應,提高定量分析的準確性和精確性。
1.化學性質穩(wěn)定:內標應具有足夠的化學穩(wěn)定性,在樣品處理和分析過程中保持穩(wěn)定。
2.與目標代謝物相似:內標的化學結構和物理性質應與目標代謝物相似,以確保它們在樣品處理過程中的行為一致。
3.同位素標記:常用的內標是穩(wěn)定同位素標記的代謝物,如同位素稀釋質譜法(IsotopeDilutionMassSpectrometry,IDMS)中使用的內標。
4.無生物活性:內標不應具有任何生物活性,以避免干擾生物體內的正常代謝過程。
5.商業(yè)可獲得性:內標應易于從商業(yè)渠道獲得,以保證實驗的順利進行。
在臨床質譜代謝分析中,內標的使用包括以下幾個步驟:
1.內標選擇:根據目標代謝物的性質選擇合適的內標。
2.內標添加:在樣品處理的早期階段添加內標,以確保在整個分析過程中都能對其進行跟蹤。
3.樣品處理:內標與樣品一起經歷相同的提取、凈化和衍生化等步驟。
4.質譜分析:內標與目標代謝物一同進入質譜儀進行分析。
5.數(shù)據分析:利用內標的信號對目標代謝物的信號進行校正,以獲得準確的定量結果。